2018年30期

柯萨奇病毒A组16型VP1蛋白的原核表达及纯化

作  者 潘朋歌,李克生,杜惠芬,曾潮宁
第一作者 潘朋歌
作者单位 宁夏医科大学,宁夏银川
卷  号 46
发表年份 2018
发表刊期 30
发表页面 99-101
关  键  字 柯萨奇病毒A组16型(CVA16);VP1蛋白;原核表达;纯化,
摘  要 [目的]原核表达并纯化柯萨奇病毒A组16型(CVA16)VP1蛋白。[方法]根据GenBank CVA16 VP1基因序列,合成VP1全基因,连接到载体pET30a,构建原核表达质粒pET30a-CVA16-VP1。将测序正确的重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导蛋白表达,Ni-NTA亲和层析纯化,SDS-PAGE和Western Blot鉴定重组蛋白。[结果]成功构建重组质粒pET30a-CVA16-VP1,表达蛋白经SDS-PAGE显示分子量约为38.7 kDa,目的蛋白以包涵体形式存在,蛋白经复性、纯化,纯度达90%以上;经Western Blot检测,证实表达的蛋白为VP1蛋白。[结论]成功获得了高纯度的VP1蛋白,为此抗原用于临床诊断打下了基础。
附  件 柯萨奇病毒A组16型VP1蛋白的原核表达及纯化
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