2018年36期

水稻OsVDAC4诱饵蛋白载体的构建及鉴定

作  者 白雪琪,谭艳平,覃永华,王亚楠,杨 武,龚秋涵,刘学群,王春台
第一作者 白雪琪
作者单位 中南民族大学生命科学学院,湖北武汉
卷  号 47
发表年份 2018
发表刊期 36
发表页面 90-94,124
关  键  字 OsVDAC4;诱饵蛋白载体;膜蛋白酵母双杂交
摘  要 [目的]获得可用于筛选膜蛋白酵母双杂交文库的诱饵蛋白载体。[方法]在对OsVDAC4进行生物信息学分析的基础上,将OsVDAC4全长ORF分别与pBT3-N和pBT3-SUC连接,构建2个诱饵蛋白载体pBT3-OsVDAC4-N-Cub和pBT3-SUC-OsVDAC4-C-Cub,利用膜蛋白酵母双杂交技术鉴定出可用于筛库的诱饵蛋白载体。[结果]pBT3-OsVDAC4-N-Cub和pBT3-SUC-OsVDAC4-C-Cub都可以与目标蛋白互作,但由于OsVDAC4的N端有约50个可自由伸展的氨基酸残基导致pBT3-OsVDAC4-N-Cub本底反应非常强,OsVDAC4的C端存在于膜中而没有可自由伸展的氨基酸残基,pBT3-SUC-OsVDAC4-C-Cub的本底反应很弱。[结论]pBT3-SUC-OsVDAC4-C-Cub可用于文库筛选,这为获取OsVDAC4的互作蛋白提供了基础。 
附  件 水稻OsVDAC4诱饵蛋白载体的构建及鉴定
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