2018年36期

以PMI为选择标记基因的雪柑遗传转化体系的优化

作  者 王会全,吴少华,余志雄
第一作者 王会全
作者单位 福建农业职业技术学院,福建福州
卷  号 47
发表年份 2018
发表刊期 36
发表页面 83-89
关  键  字 柑橘;6-磷酸甘露糖异构酶;遗传转化
摘  要 [目的]以PMI为选择标记基因对雪柑的遗传转化体系进行优化。[方法]对农杆菌的菌液浓度、实生苗培养条件、甘露糖筛选压、2,4-D浓度、2,4-D预处理时间、农杆菌侵染时间、共培养时间进行梯度试验来研究转化后的再生率,并对筛选培养基中6-BA和NAA不同浓度组合进行试验来研究抗性大苗的筛选。[结果]经过暗培养20 d光培养10 d条件的实生苗外植体在农杆菌菌液OD600为0.6,1.0 mg/L 2,4-D预处理3 h,农杆菌侵染30 min,共培养时间4 d,筛选压为甘露糖20 g/L的情况下转化后的再生率大大提高,而在筛选培养基中加入2 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA有助于抗性大苗的筛选。[结论]通过对影响转化的各种因素的优化试验建立了雪柑以PMI基因/甘露糖选择标记系统的高效遗传转化体系。
附  件 以PMI为选择标记基因的雪柑遗传转化体系的优化
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