2019年02期

拟南芥MDH2基因GFP载体构建及转基因植株的筛选鉴定

作  者 王媛媛,韩洋洋,耿庆鎏,朱香豫,曹树青,樊婷婷
第一作者 王媛媛
作者单位 合肥工业大学食品与生物工程学院,安徽合肥
卷  号 47
发表年份 2019
发表刊期 2
发表页面 96-98
关  键  字 拟南芥;MDH2;载体;转基因植株
摘  要 [目的]以野生型拟南芥为材料构建MDH2基因GFP载体及GFP转基因植株,研究MDH2基因在植物响应镉胁迫机制中的功能。[方法]通过提取野生型拟南芥的RNA,反转录成为cDNA,并以cDNA为模板,利用PCR扩增MDH2基因,将扩增所获得MDH2基因和pXB94-GFP质粒双酶切后连接,并转化进大肠杆菌感受态细胞中,鉴定正确后再转入农杆菌感受态细胞中,通过菌落PCR鉴定出阳性单菌落。再通过浸花法转入野生型拟南芥中,最后利用抗性筛选和PCR鉴定获得MDH2转基因阳性植株。[结果] 成功克隆MDH2基因,并构建了MDH2GFP重组质粒,抗性筛选获得了MDH2GFP转基因植株。[结论]成功获得MDH2GFP转基因植株,为进一步研究该基因在植物响应镉胁迫机制中的功能奠定了基础。
附  件 拟南芥MDH2基因GFP载体构建及转基因植株的筛选鉴定
注:若需下载,请右键单击另存
点击关闭

在线客服

服务热线:0551-65160973

二维码