2019年02期

慢病毒介导PNX沉默细胞株的构建与鉴定

作  者 丁毅飞,曹春雨,王凭青
第一作者 丁毅飞
作者单位 重庆大学生物工程学院,重庆
卷  号 47
发表年份 2019
发表刊期 2
发表页面 94-95,110
关  键  字 慢病毒;PNX;生殖
摘  要 [目的]构建慢病毒介导的PNX沉默载体,感染GnRH分泌细胞(GT1-7)后进行筛选鉴定,获得稳定的PNX沉默细胞株。[方法]结合RNAi干扰技术构建出慢病毒沉默载体,在293T细胞中包装病毒并测定滴度。感染GnRH分泌细胞(GT1-7),嘌呤霉素筛选得到稳定细胞后利用Real-time PCR和Western blot检测PNX沉默效果。[结果]慢病毒介导的PNX沉默载体构建成功,包装的慢病毒成功感染GT1-7细胞,并且Real-time PCR和Western blot证实了PNX沉默细胞株的PNX沉默效果。[结论]成功构建了慢病毒介导的PNX沉默细胞株,为以后探索PNX对动物生殖发育的作用打下了基础。
附  件 慢病毒介导PNX沉默细胞株的构建与鉴定
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