2019年02期

拟南芥SPM12基因GFP载体构建及转基因植株筛选

作  者 方雪,徐洁娜,孟杏楠,曹树青,樊婷婷
第一作者 方雪
作者单位 合肥工业大学食品与生物工程学院,安徽合肥
卷  号 47
发表年份 2019
发表刊期 2
发表页面 86-88
关  键  字 拟南芥;SPM12;载体;GFP转基因植株
摘  要 [目的]为了进一步研究SPM12基因的功能,利用哥伦比亚(Columbia,Col)遗传背景的野生型拟南芥材料构建SPM12基因GFP载体及其转基因植株。 [方法] 以野生型拟南芥的RNA反转录成的 cDNA为模板,PCR扩增出SPM12基因的CDS全长序列,将其连接到GFP载体的质粒上;然后将构建成功的重组质粒转化到大肠杆菌DH5α受态细胞中,挑取阳性菌落经PCR鉴定并测序后,将其质粒转入农杆菌GV3101感受态细胞中。PCR鉴定出阳性菌落后,通过浸花法将其转入野生型拟南芥植株中。收种子后,使用带有抗性的选择性培养基筛选出阳性植株。[结果]通过SPM12基因CDS片段和SPM12-GFP重组质粒的获得,构建了SPM12-GFP载体和其转基因植株。 [结论]成功获得拟南芥SPM12-GFP转基因植株,为进一步研究拟南芥SPM12基因的功能与分子机制奠定了基础。
附  件 拟南芥SPM12基因GFP载体构建及转基因植株筛选
注:若需下载,请右键单击另存
点击关闭

在线客服

服务热线:0551-65160973

二维码