2019年12期

猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白1α多克隆抗体的制备及应用

作  者 赵慧君,赵旭阳,史西保,陈静,范小敏,司朝朝,王丽,李青梅,常晓博,李雪莹,付建蒙,徐雅甜,邓瑞广,张改平
第一作者 赵慧君
作者单位 河南农业大学生命科学学院
卷  号 47
发表年份 2019
发表刊期 12
发表页面 115-119,131
关  键  字 PRRSV;nsp1α;多克隆抗体
摘  要 以真核质粒pcDNA3.1-flag-nsp1α为模板,利用PCR扩增出nsp1α基因片段,构建原核重组载体pET32a-nsp1α,转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态,1 mmol/L IPTG在37  ℃诱导表达6 h,成功获得以包涵体形式存在的重组蛋白,能够与小鼠抗His标签单克隆抗体反应;包涵体复性后作为抗原免疫新西兰大白兔,3次免疫后20 d获得兔多抗血清。通过间接ELISA、Western blot、间接免疫荧光、免疫组化等试验获得了高效价的兔多抗血清,该血清能够特异性地识别真核质粒表达的nsp1α以及PRRSV BJ4株。该试验成功表达了pET32a-nsp1α重组蛋白,并制备了高效价、高特异性的兔抗nsp1α多克隆抗体。
附  件 猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白1α多克隆抗体的制备及应用
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