2020年05期

H9和H10亚型禽流感病毒二重RT-PCR检测方法的建立

作  者 李丹,谢芝勋,李孟,罗思思,谢丽基,张民秀,黄娇玲,范 晴,王 盛,谢志勤,邓显文,曾婷婷,张艳芳
第一作者 李丹
作者单位 广西壮族自治区兽医研究所, 广西兽医生物技术重点实验室, 广西南宁
卷  号 48
发表年份 2020
发表刊期 5
发表页面 96-99
关  键  字 禽流感病毒;H9亚型;H10亚型;二重RT-PCR
摘  要 [目的]建立可同时鉴别检测H9和H10亚型禽流感病毒(AIV)的二重RT-PCR检测方法。[方法]根据GenBank中H9和H10亚型AIV的HA基因保守序列,分别设计2对特异性引物,优化引物之间的浓度与退火温度等条件,建立了可同时鉴别检测H9和H10亚型AIV的二重RT-PCR检测方法。[结果]特异性试验结果表明,该方法可以特异性扩增出H9和H10亚型AIV对应大小的目的条带,而对其余亚型禽流感病毒及其他禽病病原体均未扩增出特异性条带。同时,该检测方法对H9和H10亚型AIV的扩增下限均为5×104拷贝/μL。临床样品的检测结果表明其与病毒分离结果相一致(100%)。[结论]该研究建立的二重RT-PCR检测方法特异性强、敏感性高,可在一管内同时鉴别检测H9与H10两种亚型AIV,为H9与H10亚型AIV的监测提供了技术支撑。
附  件 H9和H10亚型禽流感病毒二重RT-PCR检测方法的建立
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