2018年19期

创伤弧菌快速检测法的建立

作  者 徐宸,王鑫,钟江
第一作者 徐宸
作者单位 复旦大学生命科学学院,上海
卷  号 46
发表年份 2018
发表刊期 19
发表页面 114-116
关  键  字 创伤弧菌;杂交瘤技术;单克隆抗体;斑点杂交;ECL,
摘  要 [目的]针对创伤弧菌(Vibrio vulnificus)采用杂交瘤技术制备单克隆抗体,基于单克隆斑点杂交技术进行改良,建立一种创伤弧菌快速检测方法。[方法]由水产品牡蛎中分离获得一株创伤弧菌FD-1,以其灭活全菌为抗原免疫小鼠,采用杂交瘤技术制备单克隆抗体。在此基础上,对传统斑点杂交技术进行优化改进,以化学发光试剂ECL替代传统TMB底物,进一步提高其灵敏度、缩短检测时间和简化操作步骤。[结果]与传统斑点杂交法相比,改良斑点杂交法的检测时间可缩短至2 h,检测限可达1×105 CFU/mL。[结论]改良斑点杂交法比传统TMB底物斑点杂交法(1×107 CFU/mL)灵敏度提高了100倍,操作过程简单,在水产品检验和医疗诊断方面具有良好的开发应用前景。
附  件 创伤弧菌快速检测法的建立
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